孔雀石綠檢測試劑盒本試劑盒原理是競爭酶聯(lián)免疫檢測方法，利用萃取劑從樣品中提取到孔雀石綠. 在固相載體微孔板中加入標(biāo)準(zhǔn)和處理的樣品，然后加入孔雀石綠抗體，反應(yīng)30分鐘后洗板，然后加入HRP標(biāo)記的孔雀石綠孵育30分后洗板，洗滌后加入顯色劑，結(jié)合的酶將無色的顯色劑轉(zhuǎn)化為藍色的產(chǎn)物;加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍色變?yōu)辄S色;在450nm波長進行檢測，樣品中的孔雀石綠濃度與吸收光強度成反比 。
 

　　孔雀石綠檢測試劑盒操作步驟：
 

　　1. 使用前將試劑盒和樣品處理物提前從冰箱中拿出來使其達到室溫。裝有洗液的洗瓶。
 

　　2.從鋁箔袋中拿出要求數(shù)量的微孔條，放入干燥劑并重新封好袋子以免微孔條受潮。
 

　　3. 用移液器吸取75 μl 樣品處理物到對應(yīng)的測試孔 ，同時在每個孔中都加入75 μl 抗體溶液。
 

　　4. 輕輕震動30秒使其混勻孵育30分。
 

　　5. 孵育完成后，將微孔中的溶液倒入水槽中，用配好的洗板緩沖液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul，微震蕩洗滌后倒掉，重復(fù)三次，總共四次洗板。拍板，去掉殘留的洗液。
 

　　6. 每個孔加入150 μL 酶標(biāo)結(jié)合物。
 

　　7. 輕輕震動30秒使其混勻孵育30分。
 

　　8. 孵育完成后，將微孔中的溶液倒入水槽中，用配好的洗板緩沖液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul，微震蕩洗滌后倒掉，重復(fù)三次，總共四次洗板。拍板，去掉殘留的洗液。
 

　　9. 每個孔加入150 μL 底物.孵育30分。
 

　　10. 每孔加入 100 μL 終止液。
 

　　11. 450nm 下讀取每個孔的吸光度值(OD)。